Synonymes

L'héparine-sulfate éliminase, l'héparitinase I

Source

Flavobacterium heparinum (recombinant)

No. d'enzyme

Numéro CAS

E.C. 4.2.2.8

37290-86-1

Réaction catalytique

L'enzyme segmente de manière sélective, par un mécanisme d'élimination, les chaînes de polysaccharides sulfatés comprenant des liaisons 1-4 entre les hexosamines et les résidus d'acide glucuronique. La réaction donne lieu à des oligosaccharides (principalement des disaccharides) contenant des acides uroniques non saturés qui peuvent se déceler à la spectroscopie UV à 232 nm. L'enzyme agit seulement sur l'héparane-sulfate, et ne segmente pas l'héparine ni les héparines de faible poids moléculaire.

Spécificité des substrats

L'héparane-sulfate

L'héparinase III segmente uniquement l'héparane-sulfate et non pas l'héparine non fractionnée ni les héparines de faible poids moléculaire.

Propriétés

• Poids moléculaire: 73,202 Da
• Point isoélectrique: 9.6 – 9.9
• pH d'activité optimale: 7 – 8
• Zone de pH d'activité: 5.5 – 9
• Plage de température optimale: 20°C – 37°C

Pureté

≥95% par "HPLC" en phase inversée (chromatographie liquide à haute pression).

Activité spécifique

>45 UI/mg

Une unité internationale (UI) se définit comme étant la quantité d'enzyme qui dégagera, à partir de l'héparane-sulfate, 1.0 µmole d'oligosaccharides non saturés par minute à 30°C et à un pH de 7.5.

Stabilité

• PN 50-012 (vial de 0.5 IU): La date d'expiration est de 30 mois de la date de fabrication, congelé à -70°C dans un tampon aqueux contenant du chlorure de sodium, du phosphate de sodium et du sucrose 5%.
• PN 50-012-001 (vial de 0.1 IU): La date d<expiration est de 30 mois de la date de fabrication, congelé à -70°C dans un tampon aqueux contenant du chlorure de sodium, du phosphate de sodium et du sucrose 5%.

Applications

• Comme réactif de recherche (dégradation des glycosaminoglycanes) .
• Pour la préparation de disaccharides d'héparane-sulfate, et la préparation de banques d'oligosaccharides .

Disponibilité

Le système breveté d'extraction à partir de F. heparinum et les procédés de fermentation et d'isolation que IBEX Pharmaceutiques a mis au point rendent possible la production de fortes quantités d'un produit de grande pureté.

Références

• Revue: "Enzymatic Degradation of Glycosaminoglycans". S. Ernst et al, Critical Reviews in Biochemistry and Molecular Biology (1995), 30(5): 387-444.

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• "Purification and Characterization of Heparinase from Flavobacterium heparinum". V.C. Yang, R.J. Linhardt, H. Bernstein, C.L. Cooney and R. Langer in J. Biol. Chem. (1985) 260(3): 1849-1857

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